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生物安全實(shí)驗(yàn)室是進(jìn)行生物安全操作的主要陣地,生物安全柜是生物安全實(shí)驗(yàn)中的重要裝備。我們就大家比較關(guān)心的醫(yī)療機(jī)構(gòu)生物安全,特別是生物安全柜的相關(guān)知識(shí)進(jìn)行了梳理,上期重點(diǎn)分享了生物安全柜、加強(qiáng)型生物安全二級(jí)實(shí)驗(yàn)室等相關(guān)定義和病原微生物分類(lèi)、生物安全實(shí)驗(yàn)室防護(hù)水平分級(jí)、生物安全柜分類(lèi)等。本期重點(diǎn)分享生物安全柜的管理。
一、日常使用生物安全柜時(shí)的注意事項(xiàng)
生物安全柜的垂直可移動(dòng)窗開(kāi)啟與關(guān)閉應(yīng)輕便,在行程范圍內(nèi)的任何位置不產(chǎn)生卡死現(xiàn)象,不應(yīng)有明顯的左右或前后晃動(dòng)現(xiàn)象,滑動(dòng)應(yīng)順暢。開(kāi)關(guān)、按鍵的操作應(yīng)靈活可靠,零部件應(yīng)緊固無(wú)松動(dòng),指示正確。
工作前預(yù)先放好實(shí)驗(yàn)材料、只放入實(shí)驗(yàn)必需的實(shí)驗(yàn)材料和物品,防止生物安全柜過(guò)載??筛邏簻缇氖占镂:π詫?shí)驗(yàn)廢棄物的容器、消毒劑及配套的消毒工具也應(yīng)放人安全柜內(nèi),以避免操作者的手臂在玻璃懸窗進(jìn)口處快速移動(dòng)或頻繁進(jìn)出干擾安全柜內(nèi)的氣流,降低了對(duì)檢驗(yàn)人員和物品的防護(hù)。
實(shí)驗(yàn)材料和物品應(yīng)按照從清潔區(qū)、半污染區(qū)到污染區(qū)的方向順序擺放,三個(gè)區(qū)域之間應(yīng)無(wú)交叉,操作過(guò)程中應(yīng)方便拿取,以避免交叉污染。
放置到生物安全柜內(nèi)的實(shí)驗(yàn)用材料和物品應(yīng)用70%的酒精或其他中性消毒劑擦拭表面清除污染,以避免污染的物品放人生物安全柜。
可能產(chǎn)生氣溶膠的設(shè)備,如混勻器、離心機(jī)等應(yīng)放置在生物安全柜的后部,離心機(jī)不得被放置在I級(jí)和Ⅱ級(jí)生物安全柜內(nèi)。
實(shí)驗(yàn)材料和物品應(yīng)盡可能的放置在靠近生物安全柜工作臺(tái)面后邊緣且不遮擋前部、后部和側(cè)部進(jìn)氣格柵的位置。體積較大的實(shí)驗(yàn)材料和物品,如盛放吸管的盤(pán)子、抽濾瓶等彼此間應(yīng)留有距離,并放在生物安全柜內(nèi)的一側(cè)避免在實(shí)驗(yàn)期間移動(dòng)。不阻斷前后空氣格柵、減少干擾氣流。避免使用干擾生物安全柜內(nèi)氣流流動(dòng)的設(shè)備和實(shí)驗(yàn)步驟
操作人員的雙臂以垂直方向緩慢伸入生物安全柜內(nèi),至少等待1min使生物安全柜內(nèi)的氣流穩(wěn)定后再進(jìn)行操作,以避免干擾安全柜內(nèi)的氣流流動(dòng)。
在工作區(qū)域工作、生物安全柜處于正常工作狀態(tài)時(shí),不應(yīng)有明顯的機(jī)震聲。
進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)使用恰當(dāng)?shù)牟僮鞣椒ūM量減少濺灑或者氣溶膠的產(chǎn)生,如有溢出及時(shí)清潔和消毒溢出。
最好用一次性接種環(huán)、電加熱器滅菌接種環(huán)。
實(shí)驗(yàn)完畢具有潛在生物危害的實(shí)驗(yàn)材料和物品應(yīng)消除表面污染,使用可滅菌的廢棄物處理袋封裝后移出生物安全柜,放入高壓滅菌鍋或其他滅菌裝置滅菌處理。
不宜在生物安全柜內(nèi)使用明火,明火易造成氣流動(dòng)蕩,破壞高效過(guò)濾(HEPA)起源吹向臺(tái)面的模式。
在關(guān)閉安全柜前應(yīng)繼續(xù)運(yùn)行至少5分鐘。
按照使用說(shuō)明書(shū)指導(dǎo)正確使用和維修。
二、清潔消毒
工作前的自?xún)艉拖?/span>
A.在工作前要讓生物安全柜的風(fēng)機(jī)至少運(yùn)行3-5分鐘,使柜內(nèi)的空氣實(shí)現(xiàn)自?xún)簟?/span>
B.安全柜的工作臺(tái)面、內(nèi)壁(不包括送風(fēng)濾器擴(kuò)散板)和觀察窗的內(nèi)表面使用70%酒精或其他中性消毒劑擦拭。消毒后再用無(wú)菌水或蒸餾水進(jìn)行擦拭以清除殘余消毒劑。
C.放到安全柜的容器和材料的表面使用70%乙醇擦拭,以減少將環(huán)境的污染物帶到安全柜內(nèi)。
D.定期對(duì)孵箱和冰箱進(jìn)行消毒。
工作結(jié)束時(shí)的表面消毒
工作完成時(shí),應(yīng)對(duì)所有的容器和設(shè)備進(jìn)行表面消毒并拿出安全柜。每天工作結(jié)束時(shí),對(duì)安全柜進(jìn)行最后的表面消毒,包括工作臺(tái)面、安全柜的邊壁、后壁、玻璃懸窗內(nèi)外側(cè)、紫外線燈管和電源輸出口以及包括試驗(yàn)設(shè)備在內(nèi)的所有物品。消毒劑可選擇70%酒精或其他中性消毒劑。
在進(jìn)行安全柜內(nèi)部消毒時(shí),操作人員除了手臂以外的 任何部位不得進(jìn)入生物安全柜內(nèi)。
三、應(yīng)急處置
一般要求
A.實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,應(yīng)開(kāi)啟風(fēng)機(jī)和氣流指示器(如果有)等,確認(rèn)生物安全柜均處于“安全”狀態(tài),如有任何故障應(yīng)立即停止工作,并報(bào)告實(shí)驗(yàn)室主任。
B.實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,操作人員應(yīng)提前準(zhǔn)備好所用應(yīng)急物品,如危害物溢出應(yīng)急處置物品,適宜消毒劑、毛巾、紙巾和可滅菌的廢棄物處理袋等,放在隨時(shí)拿到投人使用的位置。
C.生物安全柜運(yùn)行時(shí),發(fā)生任何氣流異常等報(bào)警,應(yīng)立即停止工作,立即報(bào)告實(shí)驗(yàn)室主任。
溢出物應(yīng)急處置
(1)發(fā)生少量噴灑時(shí)的清潔消毒
在生物安全柜內(nèi)發(fā)生少量(體積小于1ml)的噴灑時(shí),立即用吸水紙巾進(jìn)行處理,將使用過(guò)的紙巾放到生物危害包里。并根據(jù)污染物的類(lèi)型選擇適宜的消毒劑擦洗臺(tái)面及內(nèi)部所有可能受污染的物品。
(2)發(fā)生大量溢出或容器破碎時(shí)的清潔消毒
a)在生物安全柜保持運(yùn)行狀態(tài),等待至少5min;
b)如操作人員的手套或防護(hù)服已經(jīng)被污染,應(yīng)在生物安全柜內(nèi)對(duì)手套消毒后,脫下手套,帶上新手套后脫掉所污染的防護(hù)服,用適當(dāng)?shù)南緞┣逑幢┞恫课唬?/span>
c)操作人員穿防護(hù)服、戴手套和眼罩,先用吸水紙巾吸收溢出物,再用浸有消毒劑的毛巾來(lái)覆蓋溢出物,作用一段時(shí)間把氣溶膠的產(chǎn)生控制到最小化;
d)對(duì)于溢出中等或高風(fēng)險(xiǎn)的物質(zhì),在確保排水閥關(guān)閉后,用消毒劑浸泡工作臺(tái)面和排水溝,讓液體通過(guò)格柵流到集水槽上,收集廢液后再?gòu)氐浊逑醇邸.?dāng)有危險(xiǎn)等級(jí)為2和3的高風(fēng)險(xiǎn)物質(zhì)溢出,需由有資質(zhì)的人員使用甲醛熏蒸法來(lái)消毒生物安全柜;
e)覆蓋溢出物的毛巾、所有柜內(nèi)操作過(guò)的物品和被污染的實(shí)驗(yàn)材料都應(yīng)使用可滅菌的廢棄物處理袋封裝后移出安全柜,高壓滅菌或采用其它有效的滅菌方法進(jìn)行處理,不適用高壓滅菌應(yīng)用消毒滅菌劑擦拭至少20min徹底清除表面污染;破碎的玻璃或其他銳器要用鑷子或鉗子處理;
f)用消毒劑擦拭生物安全柜內(nèi)壁、工作表面以及玻璃懸窗內(nèi)側(cè),作用一定時(shí)間后,用潔凈水擦干凈消毒劑殘留;
g)處理完畢操作人員應(yīng)更換污染的防護(hù)服及手套,封裝后按照實(shí)驗(yàn)室醫(yī)療廢物進(jìn)行處理,并用肥皂和清水清洗手和暴露的皮膚;
h)全部步驟結(jié)束后生物安全柜應(yīng)繼續(xù)運(yùn)行2min~3min以清除工作區(qū)域內(nèi)浮塵污染;
i)再次使用前生物安全柜應(yīng)至少運(yùn)行15min再開(kāi)始實(shí)驗(yàn)操作。
(3)如果溢灑物流人生物安全柜內(nèi)部或需要浸泡集水槽,在清理前應(yīng)報(bào)告設(shè)備管理員,需要評(píng)估后再采取適當(dāng)?shù)拇胧?/span>
四、日常維護(hù)
定期清潔操作臺(tái)面和前窗玻璃;
保持室內(nèi)空氣質(zhì)量,延長(zhǎng)高效過(guò)濾器使用壽命;
定期檢測(cè)紫外燈的照射強(qiáng)度,及時(shí)更換燈管;
長(zhǎng)期不用應(yīng)定期進(jìn)行維護(hù)性運(yùn)行;
高效過(guò)濾器應(yīng)定期檢測(cè),及時(shí)更換;
做好使用和維護(hù)記錄。
五、生物安全柜的檢測(cè)要求
根據(jù)WS 233-2002《微生物和生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全通用準(zhǔn)則》的相關(guān)規(guī)定,有下列情況之一時(shí),必須對(duì)生物安全柜進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè):
(1)生物安全實(shí)驗(yàn)室竣工后,投入使用前,生物安全柜已安裝完畢;
(2)生物安全柜被移動(dòng)位置后。
(3)生物安全柜進(jìn)行檢修后。
(4)生物安全柜更換高效過(guò)濾器后。
(5)生物安全柜一年一度的常規(guī)現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)
依據(jù)SNT3901-2014《生物安全柜使用和管理規(guī)范》,在生物安全柜的檢定周期內(nèi)應(yīng)至少開(kāi)展1次生物安全柜的期間核查,實(shí)驗(yàn)室可根據(jù)生物安全柜的使用頻次和實(shí)驗(yàn)室所開(kāi)展的檢測(cè)工作的危害程度增加期間核查次數(shù)。期間核查的內(nèi)容至少應(yīng)包括垂直氣流平均風(fēng)速、工作窗口氣流流向、潔凈度。
小結(jié)
生物安全柜在實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)上有著重要的作用,只有規(guī)范其使用管理,才能充分發(fā)揮生物安全柜的防護(hù)性能,規(guī)避感染風(fēng)險(xiǎn),實(shí)現(xiàn)真正意義上的實(shí)驗(yàn)室生物安全。
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