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組織經(jīng)固定后會有大量水分,組織脫水是用某些溶劑逐漸將組織內(nèi)的水分置換出來,以利于透明劑和石蠟的滲入,從而保證組織硬度,避免切片時產(chǎn)生組織變形。
流程
組織脫水主要包含脫水、透明、浸蠟等環(huán)節(jié)。
脫水
脫水的目的是將組織內(nèi)的水分用某些化學(xué)試劑置換出來,使組織內(nèi)外的脫水劑濃度達到平衡狀態(tài)。
脫水劑的特點是能夠同時以任何比例與水和透明劑混合。根據(jù)其效果和性質(zhì)可分為單純脫水劑(如乙醇、丙酮等)和脫水兼透明劑(如正丁醇、異丁醇等),其中乙醇最為常用。
透明
透明的目的是用某些化學(xué)試劑將組織中的脫水劑置換出來,以利于浸蠟和包埋,組織塊浸入這些試劑后呈半透明狀。
透明劑的特點是既可與脫水劑相溶又能和包埋劑相溶。常見的透明劑有二甲苯、苯、氯仿、正丁醇等。其中最常用的是二甲苯,其特點是無色、透明、有毒、易揮發(fā),透明作用極強。
浸蠟
浸蠟的目的是用石蠟等支持物去置換、替代組織中的透明劑,使組織具有一定的硬度,有利于切片
最常使用的浸透劑是石蠟(既是浸透劑又是包埋劑)
注意事項
技術(shù)人員必須經(jīng)過培訓(xùn)、考核合格后方能上崗進行各項操作
組織固定必須充分,不充分時,脫水劑乙醇會凝固蛋白質(zhì),引起組織收縮和硬化
組織處理所使用的試劑體積至少時組織體積的5倍
乙醇在脫水時應(yīng)從低濃度向高濃度逐級進行脫水
脫水處理過程應(yīng)緩慢進行,脫水不足會使透明劑滲透到組織內(nèi)部困難,同時組織水分過多標(biāo)本發(fā)軟,或無法透明
脫水試劑應(yīng)根據(jù)處理的組織塊數(shù),使用時間及頻次進行更換
更換試劑時,要注意換液方式及液體的濃度,如果位置調(diào)換錯誤或濃度有誤,會使組織表面硬化,導(dǎo)致組織內(nèi)部的水分無法被置換出來
根據(jù)組織固定程度和組織塊大小設(shè)定時間,手術(shù)標(biāo)本的處理時間一般大于活檢標(biāo)本處理時間,最好能分開處理
如果使用加溫方式進行脫水,要縮短處理時間,一般溫度不宜超過45℃,試劑更換間隔也應(yīng)縮短
減少組織處理過程中二甲苯帶進入石蠟中的量,如果脫水不徹底或脫水機濃度降低,組織內(nèi)含有少量水份,會阻礙石蠟的滲透,導(dǎo)致組織變干、變脆、變硬
石蠟熔化應(yīng)在溫箱或熔蠟箱內(nèi)進行,熔解后使用上清石蠟,不能使用明火加熱
浸蠟時間應(yīng)根據(jù)組織種類、大小確定。時間過長,易造成組織變硬、變脆,切片易碎;時間不足,會導(dǎo)致組織較軟,難以切成完好切片
更換試劑時,所有試劑應(yīng)按醫(yī)療廢液處理,石蠟按谷提醫(yī)療廢物處理,不能隨意傾倒
應(yīng)建立一系列易燃化學(xué)物品的使用管理制度,并定期培訓(xùn)及演練,以確保安全使用。
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