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病毒是一種個體微小，結(jié)構(gòu)簡單，只含一種核酸DNA或RNA，必須在活細胞內(nèi)寄生并以復制方式增殖的非細胞型生物。病毒是一種非細胞生命形態(tài)，它由一個核酸長鏈和蛋白質(zhì)外殼構(gòu)成，病毒沒有自己的代謝機構(gòu)，沒有酶系統(tǒng)。
真空凍干病毒
冷凍干燥全稱真空冷凍干燥，簡稱凍干，是在低溫減壓條件下，利用水的升華使制品低溫脫水而達到干燥的一種技術(shù)。凍干在低溫低氧條件下進行，多數(shù)生物反應(yīng)停滯，且處理過程無液態(tài)水存在，使物料原有結(jié)構(gòu)和形狀得到大程度的保護。
真空凍干病毒比較穩(wěn)定，可于室溫短期保存， 4~8℃長期保存。此法綜合利用了各種有利于毒種保存的因素，具有成活率高，變異性小等優(yōu)點，是常用的較理想的毒種保存方法之一。病毒疫苗凍干主要關(guān)注的是凍干后病毒滴度、殘余水分、熱穩(wěn)定性、抗原性及相關(guān)免疫實驗。
凍干病毒會使用保護劑，保護劑一般采用脫脂牛奶或血清、人血白蛋白等，作用機理是在冷凍干燥的脫水過程中穩(wěn)定病毒結(jié)構(gòu)，防止細胞膜受冷凍或干燥而造成損傷。
實驗過程
第一步
將滅活后的病毒液制備藍耳病病毒核酸檢測標準物質(zhì)，將純化后的病毒進行無菌檢測、外源性病毒檢測。
第二步
將凍干保護劑與藍耳病病毒液混合搖勻后，移液分裝至10支容量為3 mL的具十字橡膠塞的無菌瓶中（十字塞的十字部分插入瓶中，塞冒懸于瓶口），每支1 mL試樣。
第三步
將10支分裝好的試樣瓶置于-80 ℃的預(yù)凍30 min后取出，預(yù)凍后樣品瓶置于冷阱溫度已達-45 ℃的凍干倉中，運行真空泵開始凍干，一直到樣品質(zhì)量不發(fā)生變化時凍干結(jié)束并在真空狀態(tài)下壓蓋密封十字橡膠塞，得到凍干后的樣品。
第四步
采用實時熒光定量RT-PCR方法檢測藍耳病病毒標準物質(zhì)的均勻性、穩(wěn)定性，得到藍耳病病毒檢測標準物質(zhì)也為該病毒定性和定量檢測提供標準物質(zhì)。
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